上海紀(jì)革森實(shí)業(yè)有限公司
一、早期生物監(jiān)測采用菌片式生物指示物，將芽孢接種于紙質(zhì)菌片上，滅菌循環(huán)完成后需通過無菌技術(shù)轉(zhuǎn)移至培養(yǎng)基中在合適的溫度下進(jìn)行培養(yǎng)，時(shí)間為7天，定期觀察培養(yǎng)基的性狀，出現(xiàn)渾濁則提示有芽孢存活。需要相同批號(hào)的未滅菌芽孢菌片和無菌培養(yǎng)基分別作為陽性對(duì)照和陰性對(duì)照進(jìn)行培養(yǎng)。陽性對(duì)照培養(yǎng)結(jié)果應(yīng)為陽性，提示培養(yǎng)程序和條件合格，芽孢在滅菌前存活；陰性對(duì)照培養(yǎng)結(jié)果應(yīng)為陰性，提示培養(yǎng)操作的無菌技術(shù)要求符合標(biāo)準(zhǔn)，培養(yǎng)基滅菌合格。由于其培養(yǎng)過程復(fù)雜，技術(shù)要求高，周期長，容易污染和受外界影響而出現(xiàn)假性結(jié)果，目前在醫(yī)院滅菌監(jiān)測中很少應(yīng)用。
△圖為菌片
△圖為無菌培養(yǎng)操作
二、20世紀(jì)70年代3M公司推出了自含式生物指示物，將細(xì)菌芽孢生長所需要的培養(yǎng)基與芽孢菌片放置于一個(gè)裝置中，菌片和培養(yǎng)基安瓿滅菌前相互獨(dú)立，滅菌暴露后擠碎安瓿，使芽孢與培養(yǎng)基充分接觸并在適當(dāng)?shù)臏囟认屡囵B(yǎng)，若芽孢未被完全滅活，芽孢生長會(huì)產(chǎn)生酸性代謝產(chǎn)物，培養(yǎng)基中所含的pH值敏感指示染料會(huì)變?yōu)辄S色。自含式生物指示物可有效防止外界雜菌的污染，因此只需要做陽性對(duì)照，而且培養(yǎng)周期一般為24－48小時(shí)，但是因培養(yǎng)時(shí)間較長，已不能適應(yīng)現(xiàn)代醫(yī)療機(jī)構(gòu)越來越快器械周轉(zhuǎn)的需求。
△圖為自含式生物指示物
三、20世紀(jì)90年代，為適應(yīng)消毒供應(yīng)行業(yè)的迅速發(fā)展，3M公司推出具有里程碑意義的世界第一款快速閱讀自含式生物指示物，將生物指示物的培養(yǎng)時(shí)間由48小時(shí)縮短到3-4小時(shí)。
△圖為快速生物指示物
之后3M持續(xù)引領(lǐng)生物指示物技術(shù)領(lǐng)域的發(fā)展，進(jìn)一步優(yōu)化快速閱讀技術(shù)，于2013年率先在全球推出極速生物指示物，將培養(yǎng)時(shí)間進(jìn)一步縮短到1小時(shí)，使生物指示物快速閱讀技術(shù)的發(fā)展推動(dòng)到前所未有的高度，成為業(yè)界的里程碑性事件。
△圖為極速生物指示物
極速生物指示物判讀原理與快速生物指示物的判讀原理相同，未完全滅活的芽孢在萌發(fā)過程中會(huì)產(chǎn)生α-葡萄糖苷酶，該酶可促進(jìn)培養(yǎng)基中非熒光底物發(fā)生水解反應(yīng)，生成具熒光活性的產(chǎn)物（4-MU）。專用的快速培養(yǎng)閱讀器配有熒光檢測系統(tǒng)，如果檢測到特定強(qiáng)度的熒光信號(hào)，即判斷培養(yǎng)結(jié)果為陽性。同時(shí)快速生物指示物也可提供48小時(shí)的pH變色指示功能。
圖為熒光判讀原理（以極速生物指示物為例）
早在2008年美國醫(yī)療機(jī)構(gòu)消毒和滅菌指南（Guideline for Disinfection and Sterilization in Healthcare Facilities）指出“快速生物指示物通過檢測嗜熱脂肪桿菌相關(guān)酶水解非熒光底物生成的熒光物質(zhì)所發(fā)出的熒光得到生物監(jiān)測結(jié)果，這一產(chǎn)品已經(jīng)在市場上銷售超過十年。研究表明，快速生物指示物的靈敏度與常規(guī)生物監(jiān)測的靈敏度相同，快速生物指示物的可靠性和24、48小時(shí)以及7天培養(yǎng)的可靠性相同”。因此，使用培養(yǎng)閱讀器培養(yǎng)時(shí)，當(dāng)閱讀器顯示“+”或“-”（陽性/陰性）結(jié)果后，則不需要保留生物指示劑。培養(yǎng)閱讀器顯示的結(jié)果就是最終的結(jié)果，生物指示劑已經(jīng)可以丟棄。
